你是否曾好奇，那些深受特异性皮炎困扰的患者，背后的疾病机制是怎样被研究的呢？今天就带大家走进特异性皮炎动物模型研究的世界。

一、前言：

特异性皮炎（Atopic dermatitis，AD）是一种慢性炎症性免疫介导的皮肤病。其主要特征为皮肤增厚、色素沉着、表面粗糙，并且伴有明显的瘙痒症状。该病症与遗传、免疫异常、环境因素以及皮肤屏障功能异常等多种因素相关。它具有病因复杂、发病率高、病程长、易复发且难以治愈等特点，严重影响着患者的生活质量。

许多研究报告指出，2,4 - 二硝基氟苯（DNFB）是一种半抗原，能够通过刺激表皮引发动物出现 AD 样皮肤病变 [1]。例如，Nam 等人就利用 DNFB 诱导的特应性症状动物模型，研究了诃子提取物的治疗效果 [2]。尽管目前在 AD 的免疫学研究方面已经取得了重大进展，然而该疾病的发病机制仍然尚未完全明确。

二、模型构建：

选取 5 周龄的 SD 大鼠，在造模前 1 天对其背部进行脱毛处理。脱毛后的第 1 天、第 2 天和第 3 天，分别在大鼠背部外涂 375μL 1% DNFB 和丙酮 / 橄榄油（3:1）混合液各一次，以此进行致敏。从第 7 天开始，每隔 1 天涂抹 262.5μL 1% DNFB 进行激发，直至第 29 天评分，造模结束。对照组则涂抹丙酮 / 橄榄油（3:1）溶液，涂抹的时间和剂量均与模型组保持相同。具体的造模流程如图 1 所示：

图1 大鼠AD模型造模流程

三、大鼠造模过程中皮肤情况展示

在造模过程中，大鼠的皮肤变化情况如图 2 所示：

图2 AD模型大鼠皮肤情况展示

四、模型评价：

1、临床症状评分：根据皮肤红肿、红斑、渗出，丘疹、丘疱疹、水疱、糜烂等湿疹样皮损表现进行评分，具体的评分标准如下表1所示，评分结果如图3所示：

表1 临床症状评分（EASI评分法）

图3  AD模型大鼠评分结果

分析：在Day29时评分结果显示，与Control相比，Model组评分显著增加，P＜0.0001。

2、病理分析：

图4  AD模型大鼠皮肤组织病理染色结果

分析：在 Day46 时，取皮损处的皮肤组织进行 HE 染色，结果显示，Control 组大鼠的皮肤组织结构规则，包含表皮、真皮、皮下组织以及较多的皮肤附属器结构，另外还可见皮肤下的横纹肌组织；而 Model 组大鼠的皮肤组织结构稍显紊乱，表皮呈现轻度增厚并伴有轻度角化过度，真皮层纤维组织增生，同时伴有较多炎细胞浸润，部分区域的皮肤附属器结构消失，皮下组织层变薄，同样可见皮肤下的横纹肌组织。并且，Model 组的皮肤厚度（如图 4 红线标注）明显高于 Control 组。

3、测量皮炎面积：

图5 AD模型大鼠皮炎面积统计和测量方法[3]

分析：研究显示 [3]，在 Day7 时，皮炎面积达到峰值。随着激发次数的增加，DNFB 模型组大鼠的皮炎面积逐渐趋于平稳。在 Day28 时，与 Control 组相比，DNFB 模型组大鼠的皮炎面积显著上升，P＜0.0001。

参考文献：

[1] Heo J C, Son H U, Kim S L, et al. A derivative of L-allo threonine alleviates 2,4-dinitrofluorobenzene-induced atopic dermatitis indications.[J].Journal of the Agricultural Chemical Society of Japan, 2012, 76(11):2021-2025.

[2]Lee,Sang-Han.Mitigation of 2,4-dinitrofluorobenzene-induced atopic dermatitis-related symptoms by Terminalia chebula Retzius.[J].International Journal of Molecular Medicine, 2011, 28(6).

[3]Xuesong, Yang,Zhimin, Wang,Hong, Huang et al. Jianpi Yangxue Qufeng compound alleviates atopic dermatitis via TLR4/MyD88/NF-κB signaling pathway.[J] .Heliyon, 2024, 10: 0.