1. 模型背景

烫伤模型由高温固体接触皮肤造成皮肤损伤。

烫伤等级分别为

（1）Ⅰ度烧烫伤：表现为受伤处皮 肤轻度红、肿、热、痛，感觉过敏，无水泡；

（2）Ⅱ度烧烫伤：表现为受伤处皮肤疼痛剧烈、感觉过敏，有水泡，水泡拨离后可见创面均匀发红、潮湿、 水肿明显；

（3）深Ⅱ度烧烫伤：表现为受伤皮肤痛觉较迟钝，可有或无水泡，基底苍白，间有红色斑点， 拔毛时可感觉疼痛；

（4）Ⅲ度烧烫伤：皮肤感觉消失， 无弹性，干燥，无水泡，蜡白、焦黄或碳化，拔毛时无疼痛。

目前用于烧伤研究的动物模型多种多样，热烧伤、化学烧伤、电烧伤以及放射性烧伤的动物模型的建立技术已较为成熟。

2. 动物建模方法—热烫伤

利用砝码放入恒温水浴锅进行加热，将加热后的砝码于动物背部固定进行致伤。 温度 80 ℃、以砝码自身重量 (0.5 kg) 作为致伤压力作用于小鼠致伤区 5 s、8 s、12 s，可获得不同面积的浅Ⅱ度、深Ⅱ度和Ⅲ度烫伤创面。

适用动物：小鼠/大鼠/新西兰大白兔

建模过程：以大鼠为例，造模前24 小时用脱毛膏将大鼠背部脱毛并麻醉大鼠，将砝码放入100℃恒温水浴锅中加热10分钟，待砝码加热后取出置于大鼠背部，紧贴大鼠背部皮肤 (持续5秒/8秒/12秒)。烫伤时砝码保持平行紧贴于大鼠背部皮肤，烫伤后烫伤区域暴露无覆盖，之后将实验组大鼠放回笼中继续饲养。

模型验证：

肉眼大体观察：致伤5s大鼠局部皮肤发红、轻微水肿。愈合后毛发生长良好，有少量红褐色色素沉着，皮肤轻微挛缩，表皮光滑。致伤10s大鼠局部皮肤发白、水肿。愈合后毛发生长良好，皮肤瘢痕形成，表面粗糙不平。

光镜观察：致伤3s大鼠表皮层次尚清楚，细胞明显肿胀、变性，层次结构尚清楚，细胞核结构不清。表皮内有水疱形成，真皮水肿、间质疏松，胶原纤维断裂，嗜酸性染色性能减退，呈嗜双色性。血管扩张、充血，皮脂腺、汗腺腺上皮细胞及毛囊上皮细胞尚清楚，部分肿胀、溶解。皮下组织中血管扩张、充血。致伤10s大鼠表皮细胞部分脱落，结构不清，明显变性、坏死，部分细胞已溶解。表皮内有水疱形成，真皮层间质疏松、充血，胶原纤维融合成片，嗜酸性染色性能减退，呈嗜双色性，大部分皮脂腺、汗腺、毛囊被破坏，结构不清，真皮深部可见残余毛囊。皮下组织血管扩张、充血、水肿明显，结构未破坏。上述结果表明，致伤3s大鼠为浅Ⅱ度烫伤，致伤10s大鼠为深Ⅱ度烫伤。

HE染色：对皮肤进行病理检查和观察：将烫伤创面连同周边皮肤约0.5 cm取下，平铺于滤纸上，然后固定于10％ 福尔马林内，纵向和横向切取宽约3-4 mm皮肤，按常规制备石蜡切片，切片厚度为5 μm，苏木素一伊红(HE)染色，用显微镜观察并照相。

IHC染色：进行Ki67染色

由皮肤病理切片可知，造模24h后大鼠皮肤表皮脱落，真皮层结缔组织坏死，有明显的水肿现象，未见皮肤附属器。造模10d后模型组大鼠皮肤组织中出现疤痕组织，可见大量的淋巴细胞、浆细胞等炎症细胞

doi. org/10.1016/j.carbpol.2024.122603.

H&E染色的伤口组织图像和用Masson染色的伤口组织图像

DOI 10.3389/fimmu.2023.1113948

与假手术相比，7s烫伤时皮下结缔组织中凋亡指标cC3显著上调。结果以平均±标准差提供。为了进行比较，我们采用了非配对t检验。显著性水平： ***p < 0.001。

模型造模要点：

注意事项：注意砝码的重量、温度等因素尽量保持一致。

风险评估：避免不当操作致动物死亡，如麻醉过度等，造模后立即腹腔注射乳酸林格氏液5 mL抗休克。