随着基因编辑技术的飞速发展,CRISPR-Cas9、TALEN、ZFN等工具已成为生命科学领域的核心利器。然而,基因编辑的成功与否,关键在于编辑效率的准确评估。如何快速、高效地检测基因编辑的效率,成为了科研人员面临的重要挑战。传统的检测方法如测序等虽然准确,但耗时长、成本高,难以满足高通量筛选的需求。因此,开发一种快速、简便的检测方法成为了当务之急。在这一背景下,T7核酸内切酶 I(T7 Endonuclease I)凭借其高灵敏度、快速反应和操作简便的特点,成为评估CRISPR-Cas9等基因编辑工具效率的理想选择。
T7 Endonuclease I是一种来源于T7噬菌体的核酸酶,能够识别并切割不完全配对的DNA、十字形结构DNA、Holliday结构或交叉DNA、异源双链DNA,也能以较慢速度切割带切刻的双链DNA,切割位点位于错配碱基5´端的第一、第二或第三个磷酸二酯键。其应用于基因编辑效率检测的作用机制如下:当基因编辑后,目标位点会形成含有错配碱基的DNA双链(如插入、缺失或点突变),T7 Endonuclease I能够识别这些错配位点,并在其附近进行切割,产生特定长度的DNA片段。
图1.T7 Endonuclease I结构及作用过程示意图[1]
基于T7 Endonuclease I在基因编辑效率检测中的的重要地位,翌圣生物隆重推出纯度高、切割活性强的T7 Endonuclease I (Cat#14548),为您的基因编辑研究提供更高效、更稳定的工具。
性能展示
T7 Endonuclease I (Cat#14548)
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切割活性强
使用翌圣和来自进口Supplier A*的T7 Endonuclease I分别与含有错配碱基的dsDNA底物进行孵育,并通过琼脂糖凝胶电泳分析谱带变化。实验结果表明,翌圣20 U的T7 Endonuclease I能有效切割200 ng含有错配碱基的dsDNA,且切割效果媲美来自进口Supplier A*的T7 Endonuclease I。
图2.T7 Endonuclease I切割效果验证(注:底物投入量-200ng)
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活动细则:
1、活动时间:2025年4月8日-2025年4月30日;
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基因编辑相关产品展示
产品应用 |
产品定位 |
产品名称 |
产品货号 |
通用型 |
带NLS的SpCas9 |
14701ES |
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荧光观察/流式分选 |
带EGFP荧光标签的SpCas9 |
11364ES |
|
基因调控 |
无剪切酶活性的Cas9 |
11351ES |
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小分子量递送 |
Cas12a |
14702ES |
|
Cas12b |
14808ES |
||
sgRNA制备 |
sgRNA合成 |
11355ES |
|
sgRNA纯化 |
12602ES |
||
编辑效率检测 |
编辑效率检测 |
T7 Endonuclease I |
14548ES |
参考文献
[1] Déclais A C, Hadden J, Phillips S E V, et al. The active site of the junction-resolving enzyme T7 endonuclease I[J]. Journal of molecular biology, 2001, 307(4): 1145-1158.
[2] Babon J J , Mckenzie M , Cotton R G H .The Use of Resolvases T4 Endonuclease VII and T7 Endonuclease I in Mutation Detection[J].Molecular Biotechnology, 2003, 23(1):73-81.DOI:10.1385/MB:23:1:73.
[3] Kazuki M , Shouta U , Junpei Y ,et al.Structure-specific DNA endonuclease T7 endonuclease I cleaves DNA containing UV-induced DNA lesions[J].The Journal of Biochemistry, 2024(1):1.DOI:10.1093/jb/mvae024.