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人(human)脂联素(Adiponectin)说明书

作者:上海史瑞可生物科技有限公司 2008-06-10T00:00 (访问量:5222)

人(human)脂联素(Adiponectin) 

本试剂盒仅供研究使用      标本:血清或者血浆

 

一、试 剂 组 成

精密度微孔板96孔

(Microtitration Strips)

1块

2~8℃干燥保存

酶标偶合液

(Conjugate )  

1瓶 12.0毫升

2~8℃冷藏保存

标准品

(Standard)

5瓶 各1.0毫升

2~8℃冷藏保存

呈色剂A

(Substrate A)

1瓶 6.0毫升

2~8℃避光冷藏保存

呈色剂B

(Substrate B)

1瓶 6.0毫升

2~8℃避光冷藏保存

终止液

(Stopping Solution)

1瓶 6.0毫升

室温保存

20倍浓缩洗涤液

(Rinsing Buffer x 20)

1瓶 60.0毫升

2~8℃冷藏保存

5倍浓缩样品稀释液

(Diluent x 5)

1瓶 15.0ml

2~8℃冷藏保存

英文说明书,中文说明书

 

各一份

室温保存

 

二、注意事项

1.  此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。

2.  使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟,

3.  浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟。

4.  浓缩样品稀释液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟

5.  若24小时内进行实验,标本可存放于2~8℃。不需及时实验,标本-20℃保存,避免反复冻融。

6.  在反复清洗微孔板,并扣干微孔中的残余液体,否则将降低精确度,造成吸光度偏离的假像。

7.  加样完毕后,应注意轻微摇动微孔反应条,以便使孔中的液体充分混匀。

8.  试剂盒保存于2~8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示。

 

三、实验前准备

1.使用前应将盒内各试剂取出,室温放置至少30分钟。

2.准备各种实验仪器及材料,如微量移液器,吸头,医用蒸馏水等

3.浓缩洗液与医用蒸馏水1︰19倍稀释后成为应用洗涤液

4.浓缩样品稀释液与医用蒸馏水1︰4倍稀释成应用样品稀释液

5.用应用样品稀释液来稀释样品,按照1:100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中,充分混匀待用。)

 

四、操 作 步 骤

1.取出酶标板,设空白孔,依照次序对应分别加入100μl的标准品于空白微孔中(空白孔视为0号标准品,用医用蒸馏水替代)

2、分别标记样品编号,加入100μl的稀释样品于空白微孔中(不同的样本采用不同的吸头)。

3、将酶标板置于37℃温育30分钟;

4、将酶标板板取出,将其中的液体甩去,每个孔中全部加满应用洗涤液后,立即甩去液体;

5、每个孔中加满应用洗涤液后,轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去,在吸水纸上将酶标板拍干。

6、重复第5个步骤5次,在吸水纸上将酶标板拍干。

7、在标准品孔和样品孔中加入100μl的酶标偶合溶液。

8、将96孔板置于37℃温育30分钟。

9、将酶标板取出,将其中的液体甩去,每个孔中全部加满应用洗涤液后,立即甩去液体。

10、每个孔中再次加满洗涤应用液后,室温轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去,在吸水纸上将酶标板拍干。

11、重复第5个步骤5次,在吸水纸上将酶标板拍干。

12、在每个孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。轻轻振荡混匀。(A液、B液采用不同的吸头加样)

13、将酶标板置于37℃避光温育反应15分钟。

14、每个微孔中加入50μl的终止液,轻轻振荡混匀。

15、在酶标仪上,450nm处测定OD; 显色后,15分钟内进行测定。

16、根据制备的标准曲线,计算样本含量

 

五、结 果 判 断

1. 仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值;

2、检测值范围:0 – 32ug/ml

3、敏感度:0.1ug/ml

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